甲基綠-派洛寧染色液

產(chǎn)品簡介：

甲基綠-派洛寧染色液(Methyl Green-Pyronin Stain，MGP)甲基綠-派洛寧染色液是一種把細胞核染成綠色或藍綠色，把細胞漿和細胞核中的核仁染成紅色或紅紫色的染色液。甲基綠又稱雙綠SF，屬于堿性染料，是具有金屬光澤的綠色微結(jié)晶或粉末，分子量為608.78，分子式為C₂₇H₃₅Cl₄N₃Zn。甲基綠和細胞核中的DNA結(jié)合，從而使細胞核染成綠色或藍綠色，派洛寧可以和細胞漿或核仁中的RNA結(jié)合，從而使細胞漿和核仁染成紅色或紅紫色。

NobleRyder甲基綠-派洛寧染色液經(jīng)過改良，不含甲醇，在組織或細胞染色中對細胞核進行染色，其中的甲基綠經(jīng)過提純，更容易著色。本染色液也可以和免疫熒光染色或免疫組化染色配合使用。10ml染色液可以染色20個樣本。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1、系列乙醇、蒸餾水

2、濾紙、RNase(可選)

3、丁三醇或丙酮或正戊醇

4、4%多聚甲醛

操作步驟(僅供參考)：

(一)石蠟切片染色

1、組織入Carnoy固定液或10%中性福爾馬林，固定3～5h。

2、切片5μm，常規(guī)脫蠟至水，蒸餾水稍洗。

3、入Methyl Green-Pyronin Stain，室溫浸染30～60min。

4、取出切片，用濾紙稍微吸干切片周圍染色液。

5、用丁三醇(也可用丙酮或正戊醇)沖洗3次，每次2～3min。

6、二甲苯透明，中性樹膠封固。

(二)冰凍切片染色

1、蒸餾水沖洗2min。

2、切片入Methyl Green-Pyronin Stain，室溫浸染25～50min。

3、用蒸餾水沖洗2次，此時樣本呈藍色。

4、余下步驟同石蠟切片染色。

(三)細胞染色

1、用4%多聚甲醛固定10min以上。

2、蒸餾水洗滌2min。

3、換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2min。

4、用Methyl Green-Pyronin Stain染色5～10min。

5、顯微鏡下觀察。

(四)熒光染色

1、如果進行免疫熒光染色，在染色后應(yīng)用70％乙醇洗滌2次，每次2min。

2、95%乙醇脫水2min。

3、PBS或鹽水或TBS等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5min。

4、進行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色。

染色結(jié)果：

陰性對照：

1、取另外一張連續(xù)切片入RNase(1mg/ml)，37℃恒溫箱內(nèi)孵育3h，蒸餾水沖洗干凈。

2、入Methyl Green-Pyronin Stain染色，余下步驟同上。RNA染色結(jié)果為陰性。

注意事項：

1、使用染色液時建議先取1~2個樣品做預(yù)實驗。

2、Methyl Green-Pyronin Stain染色可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間。

3、有些粘液細胞有可能被派洛寧染成紅色，應(yīng)注意區(qū)分。

有效期：12個月有效。

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