The Well BioscienceVitroGel水凝膠體

3D培養(yǎng)至少有五種方法，一種水凝膠就能實(shí)現(xiàn)

The Well Bioscience是—家位于美國新澤西州的高科技創(chuàng)新生物技術(shù)公司。成立于2017年，專注于開發(fā)更易用的、無動(dòng)物成分、可自定義的三維細(xì)胞培養(yǎng)的解決方案。產(chǎn)品為各種修飾分子修飾的VitroGel和VitroINK，新推出了專門培養(yǎng)類器官、ES/iPS、MSC等培養(yǎng)基質(zhì)。

3D培養(yǎng)如火如荼的今天，尋求更易用、普適的培養(yǎng)基質(zhì)成為了關(guān)乎細(xì)胞培養(yǎng)效率及結(jié)果的關(guān)鍵一環(huán)。

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現(xiàn)在為大家介紹的無異源的VitroGel水凝膠體系有多種用途?？梢赃x擇即用型VitroGel實(shí)現(xiàn)簡單的操作，也可以通過“Mix&Match”濃縮型VitroGel來構(gòu)建個(gè)性化的微環(huán)境。

這里我們整理了水凝膠*熱門的五種使用方式，包括：

• 3D細(xì)胞培養(yǎng)
• 2D水凝膠包被
• 靜態(tài)懸浮培養(yǎng)
• 水凝膠-細(xì)胞珠
• 動(dòng)物注射

這5種培養(yǎng)方法適用于即用型和濃縮型VitroGel。用VitroGel®細(xì)胞回收液可以很容易地收獲在用方法培養(yǎng)的細(xì)胞，從而進(jìn)行下游分析或傳代培養(yǎng)。

一、3D細(xì)胞培養(yǎng)

VitroGel是3D細(xì)胞培養(yǎng)的理想選擇。通過在室溫下簡單地將VitroGel溶液與細(xì)胞懸液混合，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)板中并加入培養(yǎng)基即可。這種3D培養(yǎng)方法使細(xì)胞被*包裹，從而增強(qiáng)了細(xì)胞-水凝膠基質(zhì)的相互作用。許多下游分析，如藥物篩選、免疫熒光分析和細(xì)胞毒性測定都可以直接在水凝膠中進(jìn)行。

二、2D水凝膠包被

2D水凝膠包被方法是介于傳統(tǒng)2D培養(yǎng)與3D細(xì)胞包埋培養(yǎng)之間的方法。通過在室溫下將VitroGel溶液與細(xì)胞培養(yǎng)基混合并轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)板上，VitroGel可以在培養(yǎng)板底部被包被成較厚的水凝膠。細(xì)胞可以直接接種至水凝膠上表面。2D水凝膠包被這種方法使得細(xì)胞與功能性水凝膠間相互作用/浸沒，并能很好的保持其與上層培養(yǎng)基的充分接觸。當(dāng)細(xì)胞在水凝膠表面遷移/聚集時(shí)，可快速形成細(xì)胞團(tuán)。2D水凝膠包被可與3D細(xì)胞培養(yǎng)方法結(jié)合，從而替代傳統(tǒng)的共培養(yǎng)：將一種細(xì)胞包裹在水凝膠中進(jìn)行3D培養(yǎng)，然后在水凝膠頂部接種另一種類型的細(xì)胞。

另外，2D包被VitroGel也可以成為研究細(xì)胞侵襲、血管生成實(shí)驗(yàn)和逐層共培養(yǎng)的*系統(tǒng)。除2D厚凝膠涂層外，將VitroGel稀釋后用于薄凝膠包被的方法效果也很不錯(cuò)。

三、3D靜態(tài)懸浮培養(yǎng)

3D靜態(tài)懸浮培養(yǎng)是VitroGel水凝膠一種*的培養(yǎng)方法。通過混合VitroGel溶液和細(xì)胞形成較軟的水凝膠，研究人員可以進(jìn)一步將水凝膠-細(xì)胞混合物與培養(yǎng)基直接混合，制成水凝膠-細(xì)胞懸液。水凝膠分散在細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)可以增加整個(gè)混合物的粘度，幫助細(xì)胞在不強(qiáng)烈攪拌的情況下保持懸浮狀態(tài)。

3D靜態(tài)懸浮培養(yǎng)易于制備，可以通過簡單地改變水凝膠和細(xì)胞培養(yǎng)基的混合比，靈活地調(diào)整各種細(xì)胞類型的接種密度和最終粘度。例如，研究者可以按固定的2:1（水凝膠溶液：細(xì)胞，v/v）制備水凝膠-細(xì)胞混合物，然后再與細(xì)胞培養(yǎng)基以1:1至1:10的比例混合，得到不同粘度的最終水凝膠-細(xì)胞混懸液。

這種培養(yǎng)方法可以用于實(shí)驗(yàn)室或工業(yè)規(guī)模的細(xì)胞放大培養(yǎng)，不再需要昂貴的生物反應(yīng)器或昂貴的培養(yǎng)容器。我們已將其用于干細(xì)胞團(tuán)和HEK293球體的培養(yǎng)。該方法也適用于我們所有即用型VitroGel和濃縮型VitroGel系統(tǒng)。培養(yǎng)后，可以 通過離心很容易地回收經(jīng)VitroGel靜態(tài)懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞。

四、水凝膠-細(xì)胞珠法

作為一種可注射的水凝膠系統(tǒng)，VitroGel具有*的剪切和流變特性。水凝膠溶液可以與細(xì)胞混合形成較軟的水凝膠，然后可以作為液滴加入細(xì)胞培養(yǎng)基中形成水凝膠-細(xì)胞珠。

這種培養(yǎng)方法不僅能將細(xì)胞包裹在水凝膠內(nèi)，以增強(qiáng)細(xì)胞-基質(zhì)相互作用，還可使整個(gè)水凝膠-細(xì)胞珠懸浮在細(xì)胞培養(yǎng)基中，以獲得優(yōu)良的培養(yǎng)基接觸面積。研究人員可以通過改變添加到培養(yǎng)基中的液滴體積來調(diào)整水凝膠珠的大小。

對(duì)于需要貼壁才能生長的細(xì)胞，如間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)，這種水凝膠-細(xì)胞珠培養(yǎng)方法是替代微載體進(jìn)行3D細(xì)胞放大培養(yǎng)的一種巧妙方式。由于具有優(yōu)良的培養(yǎng)基和氧氣穿透力，在水凝膠珠中培養(yǎng)的細(xì)胞可以保持較高的細(xì)胞活力，從而進(jìn)行長期培養(yǎng)。該方法適用于所有即用型VitroGel和高濃度VitroGel系統(tǒng)。使用VitroGel水凝膠-細(xì)胞珠培養(yǎng)的細(xì)胞可通過VitroGel細(xì)胞回收液進(jìn)行回收。

五、動(dòng)物注射

VitroGel同樣也是一種優(yōu)秀的動(dòng)物注射載體。在機(jī)械剪切力作用下，通過注射器注射，水凝膠可以進(jìn)行凝膠-溶膠的轉(zhuǎn)變，成為自由流動(dòng)狀態(tài)。然而，一旦剪切力停止，水凝膠的機(jī)械強(qiáng)度可以隨著溶膠-凝膠轉(zhuǎn)變而迅速恢復(fù)，再次成為水凝膠狀態(tài)。VitroGel具有這種可注射的特性，可用于體內(nèi)細(xì)胞/藥物遞送，用于細(xì)胞治療或控釋。

室溫下將水凝膠溶液與細(xì)胞/化合物混合，水凝膠可在20 min內(nèi)注射。除了即用型VitroGel，還可以使用濃縮型VitroGel水凝膠得到不同強(qiáng)度的可注射水凝膠。

The Well Bioscience品牌即用型水凝膠產(chǎn)品貨號(hào)：

The Well Bioscience品牌濃縮型水凝膠產(chǎn)品貨號(hào)：

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